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細菌活化的操作流程

 更新時(shí)間:2024-07-10    點(diǎn)擊量:742
  活化就是將保藏狀態(tài)的菌種放入適宜的培養基中培養,逐級擴大培養得到純而壯的培養物,即獲得活力旺盛的、接種數量足夠的培養物菌種發(fā)酵有一般需要2-3代的復壯過(guò)程,因為保存時(shí)的條件往往和培養時(shí)的條件不相同,所以要活化,讓菌種逐漸適應培養環(huán)境。那么你知道細菌活化的操作流程是什么嗎?讓我們一起來(lái)看看吧!
 
  1. 在無(wú)菌操作下,用無(wú)菌微量吸管,從已溶解的管中吸取50μL(或1-2滴)的菌液,滴入固態(tài)培養基(培養基編號及溫度示于菌株訂購單)某一邊緣附近,以劃線(xiàn)法接種于培養基。
 
  2. 將接種好的培養基置于溫度的培養箱中培養。
 
  3. 在無(wú)菌環(huán)境下,以沾有75%酒精的棉花擦拭外管,在火焰上加熱外管之尖端。滴數滴無(wú)菌水于加熱處,使外管破裂,再以硬棒敲破尖端。取出隔熱纖維紙和內管,以滅菌過(guò)的鑷子取出內管之棉塞。
 
  4. (a)適用于細菌用無(wú)菌吸管,吸取0.3-0.5mL之液體培養基,滴入內管內,并輕微震蕩(可用該吸管協(xié)助),直到均勻懸浮。
 
  (b)適用于霉菌、酵母菌用無(wú)菌吸管,吸取0.3-0.5mL無(wú)菌水,滴入內管內,待干燥粉末溶解后,以無(wú)菌吸管吸取并滴入約含有5ml無(wú)菌水之試管內,輕微震蕩使其均勻后,靜置30至60分鐘。
 
  5. 取0.1-0.2mL之菌體懸浮液于平板培養基上,做劃線(xiàn)分離培養或做成一系列之稀釋?zhuān)脽o(wú)菌L型玻棒均勻涂抹,以檢驗菌種之純度及活化情形,而剩余的菌體則全部移入液體培養基內,并依溫度培養之。
 
  6. 某些菌種經(jīng)過(guò)冷凍干燥保存后,遲滯期(lagperiod)較長(cháng),必須等培養二倍時(shí)間后才能長(cháng)出,且再經(jīng)過(guò)一、二次繼代培養(Subculture)后才能正常生長(cháng)。經(jīng)過(guò)以上的努力后仍培養失敗,才視為不能活化。
 
  7. 未開(kāi)封之冷凍干燥管,請冷藏于4℃冰箱,切勿冷凍保存。
 
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