上次我們分享了IHC未染色或無(wú)信號的原因分析，這次讓我們來(lái)看看IHC染色不均勻是為什么吧。

一、組織切片制備

解釋：組織切片薄厚不均勻

→建議：更換刀片

二、組織固定

1.解釋：酒精固定不足會(huì )產(chǎn)生偽影；

→建議：延長(cháng)固定時(shí)間；嘗試不同的固定液

2.解釋：固定延遲導致抗原擴散；

建議：立即固定組織；可以考慮使用交聯(lián)固定劑

三、脫蠟

解釋：脫蠟不wan全

→建議：使用新鮮的二甲苯

四、抗體兼容性

解釋：一抗可能結合其他抗原上的表位

→建議：從多抗切換至單抗；嘗試不同的單抗

五、透化

解釋：細胞膜被破壞，膜蛋白丟失

→建議：使用低濃度或更溫和(Tween-20)的透化試劑

六、組織切片狀態(tài)

解釋：組織切片未保持濕潤

→建議：在染色階段避免組織切片干燥

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