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022-66387942簡(jiǎn)要描述:體內mRNA轉染試劑——PolyTool™ mRNA Transfection Reagent in vivo,專(zhuān)用于體內mRNA遞送,脾臟靶向能力you越,誘導的體液和細胞免疫強烈。特別的是,通過(guò)肺部給藥,其在肺部表達高效。
體內mRNA轉染試劑——PolyTool™ mRNA Transfection Reagent in vivo,專(zhuān)用于體內mRNA遞送,脾臟靶向能力優(yōu)yue,誘導的體液和細胞免疫強烈。特別的是,通過(guò)肺部給藥,其在肺部表達高效。
一、實(shí)驗操作流程
1.載mRNA納米顆粒的制備
取兩個(gè)無(wú)菌無(wú)酶1.5 mL離心管,其中一個(gè)離心管加入5 μL 1 mg/mL的Luc mRNA,并用5 %的葡萄糖溶液補至100 μL,混勻;另一個(gè)離心管加入25 μL 1 mg/mL的 PolyTool™ mRNA Transfection Reagent in vivo并用
5 %的葡萄糖溶液補至100 μL,混勻;將兩個(gè)離心管中的溶液快速混合到一起,渦旋10 s,靜置10 min 即可得到200 μL載mRNA納米顆粒溶液。
2.載mRNA納米顆粒的體內給藥
將得到的200 μL納米顆粒吸入1 mL胰dao素注射器中,在C57BL/6小鼠的大腿內側進(jìn)行肌肉、靜脈或肺部gei藥(肺部gei藥最多40 μL)注射。注射完畢后確定小鼠無(wú)異常后將小鼠放回籠中。
3.活體成像檢測Luc mRNA的表達
在肌肉注射納米顆粒6 h,12 h,24 h,48 h,72 h后通過(guò)Perkin Elmer的Lumina II或Lumina III評價(jià)材料的體內轉染性能。應提前對小鼠的成像部位進(jìn)行剃毛,并配置熒光素鉀鹽溶液備用(每只鼠3 mg,溶于200 μL PBS溶液中,現配現用)。將熒光素鉀鹽溶液通過(guò)腹腔注射給小鼠,靜置5-10 min后進(jìn)行活體成像。采用生物發(fā)光模式,曝光時(shí)間為60 s,可采用連續拍攝模式,每間隔1 min拍攝一次,直到獲取最大的發(fā)光值。
活體成像結果如下圖所示:
使用PolyToolTM mRNA Transfection Reagent in vivo體液免疫結果如下圖所示:
使用PolyToolTM mRNA Transfection Reagent in vivo細胞免疫結果如下圖所示:
二、產(chǎn)品優(yōu)勢
優(yōu)秀的轉染效率:體內mRNA遞送,表現出優(yōu)xiu的轉染效率,特別是脾臟靶向能力you越。
細胞毒性低:作用溫和,能更好的實(shí)現高轉染效率與低細胞毒性之間的平衡。
操作簡(jiǎn)單:只需4步,無(wú)需換液,快速簡(jiǎn)便增加。
體內mRNA轉染試劑中科百抗PolyTool™ mRNA Transfection Reagent in vivo代理——天津益元利康生物科技有限公司,成立于2018年,坐落于天津經(jīng)濟技術(shù)開(kāi)發(fā)區。公司產(chǎn)品線(xiàn)涉及細胞與基因治療、免疫學(xué)、分子生物學(xué)、細胞生物學(xué)等多個(gè)方向,專(zhuān)注于生命科學(xué)試劑、耗材、細胞、儀器等產(chǎn)品銷(xiāo)售,經(jīng)營(yíng)的品牌主要有:ThermoFisher、Sigma、Qiagen、EZBioscience、ZYMO Research、MedKoo、Abcam等等。我們提供質(zhì)優(yōu)價(jià)美的產(chǎn)品、及時(shí)到位的服務(wù),努力成長(cháng)為生命科學(xué)和生物技術(shù)企業(yè)的優(yōu)質(zhì)供應商。
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