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上次我們分享了IHC未染色或無(wú)信號的原因分析，這次讓我們來(lái)看看IHC染色不均勻是為什么吧。一、組織切片制備解釋?zhuān)航M織切片薄厚不均勻→建議：更換刀片二、組織固定1.解釋?zhuān)壕凭潭ú蛔銜?huì )產(chǎn)生偽影；→建議：延長(cháng)固定時(shí)間；嘗試不同的固定液2.解釋?zhuān)汗潭ㄑ舆t導致抗原擴散；建議：立即固定組織；可以考慮使用交聯(lián)固定劑三、脫蠟解釋?zhuān)好撓灢粀an全→建議：使用新鮮的二甲苯四、抗體兼容性解釋?zhuān)阂豢箍赡芙Y合其他抗原上的表位→建議：從多抗切換至單抗；嘗試不同的單抗五、透化解釋?zhuān)杭毎け黄茐模さ鞍讈G...

IHC未染色或無(wú)信號的原因：一、?抗體問(wèn)題?：抗體與一抗或二抗不兼容、抗體濃度不合適、抗體失效或儲存不當等都會(huì )導致無(wú)染色。例如，使用抗一抗種屬來(lái)源的二抗，確認二抗是否識別一抗的亞型；使用更高濃度的抗體或延長(cháng)孵育時(shí)間；設置陽(yáng)性對照，確保抗體仍然有效?。二、?抗原修復不足?：固定步驟可能會(huì )改變抗體識別的抗原表位，導致抗原修復不足。使用微波或壓力鍋進(jìn)行抗原修復，確保使用新鮮配置的修復液?。三、?樣本處理不當?：樣本存放時(shí)間過(guò)長(cháng)、切片制備不當（如脫蠟不ce底）、組織切片干片等都會(huì )影響...

一、蛋白芯片簡(jiǎn)介?蛋白芯片?是一種高通量的蛋白質(zhì)功能分析檢測技術(shù)，主要用于監測蛋白質(zhì)之間的相互作用。其基本原理是將各種蛋白質(zhì)有序地固定于載體上，然后利用標記了特定熒光物質(zhì)的抗體與芯片上的蛋白質(zhì)結合，通過(guò)熒光強度分析蛋白質(zhì)的表達數量和相互作用關(guān)系?。二、蛋白芯片的工作原理蛋白芯片通過(guò)將已知的蛋白質(zhì)分子固定在固相載體上，然后捕獲與之特異性結合的待測蛋白質(zhì)。這些待測蛋白質(zhì)可能存在于血清、血漿、尿液等生物樣本中。通過(guò)洗滌和純化步驟后，利用熒光掃描儀或激光共聚掃描技術(shù)測定各點(diǎn)的熒光強度...

本文介紹一下用勻漿器研磨法提取貼壁細胞核蛋白的具體操作。一、前期準備1、臺盼藍染液：取臺盼藍粉劑，將其溶解在10mL的雙蒸水當中配制成質(zhì)量體積比為4%（4%w/v）的臺盼藍母液。在使用時(shí)，利用PBS緩沖液將母液稀釋10倍，使其濃度達到0.4%，之后再與細胞懸液混合均勻。2、BufferA：包含10mmol/L的HEPES（在4℃下pH值為7.9）、1.5mmol/L的氯化鎂、10mmol/L的KCL、0.5mmol/L的二硫蘇糖醇（DTT）。若擔心漿蛋白降解會(huì )對核蛋白產(chǎn)生影響...

一、光學(xué)顯微鏡觀(guān)察凋亡細胞的主要特征為核染色質(zhì)致密深染，形成致密質(zhì)塊，有時(shí)可碎裂。檢測方法：細胞涂片或組織石蠟切片作HE染色或Giemsa染色，在高倍物鏡下觀(guān)察凋亡細胞的形態(tài)改變，結合顯微測量工具可作凋亡細胞計數。二、視頻時(shí)差顯微技術(shù)細胞培養中常用，通過(guò)相差顯微鏡可動(dòng)態(tài)觀(guān)察細胞凋亡的變化過(guò)程，尤其是觀(guān)察細胞表和外形的變化。檢測方法：收集2×10^5細胞/ml培養的細胞，置于多孔培養板，加入凋亡誘導劑，在帶有自動(dòng)攝像裝置的相差顯微鏡下觀(guān)察凋亡細胞的動(dòng)態(tài)改變，每隔1分鐘作序列攝影...